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      想知道液相色譜柱在選用前都需要了解些什么嗎?
      發布時間:2019-09-24   點擊次數:935次
         液相色譜柱基于熔融核技術,性能超越傳統全孔5μm和3μm色譜柱,在不增加柱壓的情況下,實現快速分離,可作為傳統5μm色譜柱的新型標準柱。
       
        液相色譜柱的性能特點:
        1、可使用100%水系流動相,柱內不會出現坍塌現象;
        2、適合于分離親水性化合物;
        3、與常規ODS不同的選擇性,加強極性化合物的保留,適合于分離純化肽類和生物分子;
        4、酸性環境下比普通ODS柱具有更長使用壽命。
       
        在選擇液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等。
        1、樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。
        2、如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
        3、若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
        4、如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。

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